雙熒光素酶檢測
? 服務(wù)介紹
雙熒光素酶檢測利用兩種不同的熒光素酶（如螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶）的相對(duì)表達(dá)量來檢測特定基因的活性。通過比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中兩種熒光素酶的發(fā)光強(qiáng)度，可以準(zhǔn)確評(píng)估靶基因的表達(dá)水平或啟動(dòng)子的活性。
①雙熒光素酶-靶基因檢測：在雙熒光素酶系統(tǒng)中，通常將目標(biāo)基因的調(diào)控序列（如啟動(dòng)子）與螢火蟲熒光素酶基因連接在一起。當(dāng)目標(biāo)基因被激活時(shí)，螢火蟲熒光素酶會(huì)發(fā)出熒光，從而實(shí)現(xiàn)靶基因的檢測。
②雙熒光素酶-啟動(dòng)子檢測：通過將感興趣的啟動(dòng)子序列克隆到熒光素酶報(bào)告基因的上游，檢測啟動(dòng)子的活性。不同條件下啟動(dòng)子活性的變化可以通過熒光強(qiáng)度的變化來反映，從而研究基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。
雙熒光素酶報(bào)告基因檢測是一種用于驗(yàn)證microRNA（miRNA）與mRNA、miRNA與長鏈非編碼RNA（LncRNA）之間的靶向互作關(guān)系的技術(shù)。Luciferase報(bào)告基因系統(tǒng)是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報(bào)告系統(tǒng)。然后可以通過熒光測定儀也稱化學(xué)發(fā)光儀(luminometer)或液閃測定儀測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光。熒光素和熒光素酶這一生物發(fā)光體系，可以極其靈敏、高效地檢測基因的表達(dá)。是檢測轉(zhuǎn)錄因子與目的基因啟動(dòng)子區(qū)DNA、miRNA與mRNA相互作用的一種檢測方法。
? 實(shí)驗(yàn)優(yōu)勢：
①免費(fèi)、專業(yè)的結(jié)合分析；
②豐富的載體選擇，免費(fèi)提供293T作為工具細(xì)胞；
③快速的克隆構(gòu)建；
④完善的配套細(xì)胞學(xué)驗(yàn)證。
? 實(shí)驗(yàn)流程
發(fā)貨標(biāo)準(zhǔn)：雙熒光素酶檢測原始數(shù)據(jù)、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告和數(shù)據(jù)分析。
客戶提供：miRNA-靶基因驗(yàn)證：靶基因、miRNA名稱及種屬；
啟動(dòng)子研究：啟動(dòng)子、轉(zhuǎn)錄因子名稱及種屬。
? 產(chǎn)品目錄表
? 結(jié)果示例
工具質(zhì)粒psiCHECK2用于miRNA與其靶點(diǎn)相關(guān)分析，包括miRNA靶基因驗(yàn)證、circRNA和lncRNA 。
1.驗(yàn)證miRNA同mRNA靶向互作。
將靶mRNA的3'UTR序列插入報(bào)告基因載體，與miRNA共轉(zhuǎn)入細(xì)胞中，如果熒光素酶活性下降，則提示為其靶序列。
2.驗(yàn)證miRNA同circRNA靶向互作。
將circRNA序列插入報(bào)告基因載體中F-Luc的3'UTR區(qū)域，與miRNA共轉(zhuǎn)入細(xì)胞中，檢測熒光素酶活性。
3.驗(yàn)證miRNA同lncRNA靶向互作。
將lncRNA序列插入報(bào)告基因載體中F-Luc的3'UTR區(qū)域，與miRNA共轉(zhuǎn)入細(xì)胞中，檢測熒光素酶活性。
? 實(shí)驗(yàn)交付示例
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